獼猴桃的抗氧化研究進展

　　摘要：獼猴桃作為一種常見水果，含有多種抗氧化活性成分，能有效保護身體免于或減輕因氧化而引起的損傷。結合近年來的研究熱點，對獼猴桃的抗壞血酸、黃酮、酚類物質和原花青素4種抗氧化活性成分的提取方法和抗氧化能力進行了綜述，并展望了研究方向。

　　本文源自農技服務,2020,37(09):6-9.《農技服務》雜志主管主辦：貴州省農業科學院。《農技服務》雜志國際標準連續出版物號：ISSN 1004-8421，國內統一刊號：CN52-1058/S，郵發代號：66-29。《農技服務》雜志是廣大農技人員、農業院校師生和農業管理者科技成果發表、獲取先進農業技術知識、了解農業政策和市場信息的優秀載體。該刊多次獲得省級“優秀期刊”稱號，在貴州省第二屆科技期刊評比中獲第一名。為了提高辦刊質量，并解決作者發表科研成果所需，我刊特邀請您和您的同事投稿。

　　獼猴桃是獼猴桃科獼猴桃屬的大型落葉木質藤本植物。獼猴桃含有獼猴桃堿、蛋白水解酶、單寧果膠和糖類等有機物，以及鈣、鉀、硒、鋅、鍺等微量元素和人體所需17種氨基酸，還含有豐富的抗壞血酸、酚類物質、黃酮和原花青素等多種對抗氧化起重要作用的生物活性物質。這些活性物質賦予獼猴桃良好的抗氧化、抗腫瘤、降低血液中的膽固醇、幫助消化、預防慢性便秘、止渴利尿和保護心臟等作用[1]。

　　自由基是機體受到氧化產生的一種具有強烈氧化性的有毒化學物質，其直接損傷細胞和機體的整個組織，并且伴隨著年齡的增長而越發嚴重。自由基將加速衰老、引起心血管異常、血管動脈發生硬化以及炎癥等病狀[2]。因此，以平衡機體細胞氧化還原系統為目的的抗氧化已經廣泛應用到食品、藥品中。已有相關研究證明，在眾多水果中，人體吸收利用獼猴桃抗氧化物質的效率比其他水果高[3]，因而具有作為天然抗氧化劑的應用前景。

　　1、獼猴桃的抗氧化活性成分

　　目前，已有大量研究證明，獼猴桃中含有的抗壞血酸、黃酮、多酚以及原花青素等均有顯著抗氧化能力[4]。近年來，抗氧化活性物質提取工藝和抗氧化活性評價已成為研究熱點。

　　1.1抗壞血酸

　　抗壞血酸(C6H8O6)是一種多羥基化合物，具有很強的還原性，在人體中的利用率可達94%[5]，對自由基有極強的清除效果，但人體缺乏合成抗壞血酸相應的酶，因此只能從外部攝取。新鮮的水果和蔬菜中均含有豐富的抗壞血酸，在獼猴桃中的含量尤為突出，素有維生素C之冠的美譽。在血清脂蛋白氧化的抗氧化劑臨床試驗中發現，抗壞血酸可以保護低密度脂蛋白(LDL)，減少心血管疾病的發生[6]和癌癥的發病率[7]。此外，其還具有提高人體免疫力、治療壞血癥、防心臟病、保護牙齒和牙齦等多種功能[8,9,10,11,12,13]。

　　1.1.1抗壞血酸的提取工藝

　　提取獼猴桃抗壞血酸常用方法有浸提法和超聲波輔助法。在浸提法提取抗壞血酸的試驗中，唐功等[14]以三氯乙酸、草酸、鹽酸+草酸混合溶液3種提取劑對獼猴桃抗壞血酸的提取量進行了對比;在超聲波輔助法提取抗壞血酸的試驗中，一般采用鹽酸和乙醇作為提取劑對獼猴桃抗壞血酸進行提取試驗[15,16]。由表1可見，采用浸提法時，使用2%草酸+10%鹽酸混合液作為提取劑，可以獲得最佳的提取效果，獼猴桃抗壞血酸提取量為78.73mg/100g;在超聲波輔助法提取抗壞血酸的試驗中，鹽酸作為提取劑，獼猴桃抗壞血酸的提取量高達140.15mg/100g;而用乙醇作為提取劑，提取獼猴桃抗壞血酸的量為78.71mg/100g。因此，在對獼猴桃抗壞血酸的提取工藝上，采用以鹽酸為提取劑的超聲波輔助法可達最佳提取效果。

　　1.1.2抗壞血酸的抗氧化活性

　　抗壞血酸是獼猴桃發揮抗氧化活性作用的主要活性物質之一[17]，能有效清除活性氧和氮種類如超氧自由基、羥基自由基、二氧化氮和硝氧自由基[18]。目前，根據相關研究顯示，獼猴桃抗壞血酸的DPPH自由基清除率的IC50是0.0039mg/mL,ABTS清除率的IC50是0.0505mg/mL，當抗壞血酸濃度在2.0～4.0mg/mL時可100%清除超氧自由基[16];抗脂質過氧化能力的IC50為1.52mg/mL，羥基自由基清除率的IC50為1.51mg/mL[19];并且，根據陳霞等[20]在大鼠身上進行試驗結果表明，抗壞血酸能有效降低丙二醛(MDA)，使超氧化物歧化酶(SOD)數量增加，保護肝臟不受酒精引起的過氧化損害。可見，抗壞血酸在體內外均具有顯著的抗氧化效果。

　　表1不同提取方式提取抗壞血酸的效果

　　1.2黃酮

　　黃酮(C15H10O2)是由碳原子連接2個含有酚羥基的苯環而形成的化合物，多以苷類形式存在于植物中。已有相關研究證明，黃酮具有抗油脂過氧化、抗病毒、抑制癌細胞生長等功效[21]，作為一種抗氧化劑已經應用于食品、藥品中。目前，已有大量研究報道獼猴桃黃酮的提取工藝和抗氧化活性。

　　1.2.1黃酮的提取工藝

　　由于黃酮結構以及存在形式的不同，不同的黃酮甙元化合物的活性和溶解度之間也有顯著差異，一般情況下游離的甙元易溶于一些有機溶劑及一些稀堿性的溶液中。目前，黃酮的提取工藝已有大量的研究報道，劉長江等[22]利用乙醇為提取劑的超聲波輔助法提取獼猴桃黃酮，平均提取率為0.0297%;王菲等[23]采用乙醇為提取劑的微波輔助法提取獼猴桃黃酮，平均提取量為0.322mg/g;何婷婷等[24]使用乙醇作為提取劑對獼猴桃汁中的黃酮進行提取，將多種提取方法進行對比(表2)，結果顯示，在相同提取劑和料液比的條件下，微波輔助法、浸提法、閃氏提取法和超聲波輔助法4種方法中微波輔助法的提取率最高，達2.98%。之后何婷婷等[24]采用纖維素酶和果膠酶對獼猴桃汁進行處理，微波輔助法、閃氏提取法和超聲波輔助法3種提取方法的提取效率分別在原有基礎上提高1%、3.7%和12.4%。因此，可以優先考慮微波輔助法進行獼猴桃黃酮的提取。

　　表2不同提取方式提取黃酮的效果

　　1.2.2黃酮的抗氧化活性

　　黃酮是一種天然抗氧化劑，可以起到清除一定自由基的能力。王菲[19]通過DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基的清除能力以及抗脂質過氧化能力4個抗氧化指標對獼猴桃中黃酮進行了抗氧化評價，黃酮清除DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基的IC50分別為0.016mg/mL、7.33mg/mL、9.16mg/mL，抗脂質過氧化能力的IC50為0.46mg/mL，而且在試驗過程中還發現，獼猴桃黃酮的抗氧化能力與其濃度成正相關。近年來，石浩等[25]發現黃酮能有效減少過氧化氫對HaCaT細胞產生的氧化傷害，對其起到很好的保護作用。表明，獼猴桃黃酮具有一定的抗氧化能力。

　　1.3多酚

　　多酚是一種由40多種化學成分組成的酚類物質，不同的結構會有不同的抗氧化能力，主要以環狀結構的形式存在于獼猴桃中。已有相關研究證明，多酚是獼猴桃抗氧化能力的重要成分之一，具有較強的清除自由基的效果。其能提高機體免疫力、治療消化不良、抑制糖尿病、抑制衰老、抗動脈慢性粥樣硬化、降低膽固醇、抗過敏引發的皮膚炎、預防阿爾茲海默癥、預防腫瘤等[26,27]。

　　1.3.1多酚的提取工藝

　　多酚由羥基化合物構成，其化學結構決定了可與多種溶劑相溶。周躍勇等[28]利用甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯溶劑進行獼猴桃多酚提取對比試驗顯示，丙酮的提取效果最好，達78.3mg/100mL;卜凡瓊等[16]確定乙醇為提取劑，采用超聲波法進行了獼猴桃多酚的提取試驗，提取量為12.3mg/100mL;張馳松等[29]使用微波輔助法提取獼猴桃多酚，提取量為28.2mg/100mL(表3)。經過數據對比得知，在以丙酮為提取劑的浸提法、以乙醇為提取劑的超聲波輔助法和微波輔助法的3種提取方法中，使用丙酮溶液作為提取劑的浸提法提取量最大，達78.3mg/100mL，而微波輔助法的提取時間最短，效率最高，但提取效果欠佳。

　　表3不同提取方式提取多酚的效果

　　1.3.2多酚的抗氧化活性

　　多酚是得到廣泛認同的有機抗氧化劑，其可提供出氫原子或電子，與金屬離子進行螯合[31,32]。卜凡瓊等[16]研究發現，獼猴桃多酚清除超氧自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的IC50值分別為0.4386mg/mL、0.0035mg/mL和0.0433mg/mL。另有相關研究表明，獼猴桃多酚的羥基自由基清除率和抗脂質過氧化IC50值分別為6.61mg/mL和251.87mg/mL，并且獼猴桃多酚能在一定程度上緩解60Coγ射線對小鼠造成的氧化損傷[27]。說明，獼猴桃多酚在體內和體外都具有較強抗氧化效果。

　　1.4原花青素

　　原花青素是由數量不同的表兒茶素或兒茶素組成，主要以糖苷的形式存在，作為目前國際上普遍認可的天然抗氧化劑，在食品、化妝品和藥品等領域應用廣泛[33]。此外，有臨床研究顯示，原花青素可以起到保護血管[34]、減少類似骨質疏松的癥狀、保護皮膚和減少腎結石等作用[35]。

　　1.4.1原花青素的提取工藝

　　因對原花青素的提取工藝研究相關文獻偏少，目前僅石浩等[37]采用超聲波提取法對獼猴桃原花青素進行了提取，即以70%乙醇作為提取劑對獼猴桃果實干燥粉進行超聲提取，再加入體積比為1∶4的正丁醇-氯仿溶液，體積為乙醇提取液的1/3，充分混勻后靜置15min，去除變形蛋白質等雜質，經過洗脫、干燥得到純度為82.36%的原花青素粉末。

　　1.4.2原花青素的抗氧化活性

　　原花青素因其單體的聚合數量和方式的不同，導致其功能和活性出現差異。關于獼猴桃原花青素的抗氧化活性研究方面鮮有報道，獼猴桃原花青素可以保護HaCat細胞免受過氧化氫的氧化傷害[36]。另有其他原花青素的研究顯示，清除DPPH自由基和ABTS自由基的IC50值分別為0.083mg/mL和0.054mg/mL[37];清除羥基自由基的IC50為0.474mg/mL[38];原花青素對不飽和脂肪酸的氧化有較好的抑制效果[39]。因此，原花青素具有較強的抗氧化效果。

　　2、展望

　　獼猴桃含有多糖、三萜及生物堿等生物活性成分，其中抗壞血酸、黃酮、多酚和原花青素提取工藝研究和抗氧化能力評價均有相關研究。在提取工藝方面，獼猴桃黃酮的提取工藝種類繁多，獼猴桃抗壞血酸和多酚次之;獼猴桃中原花青素的提取工藝研究較少;因而應進一步探討原花青素的提取工藝方法。在抗氧化性方面，抗壞血酸和多酚的抗氧化能力較強，黃酮和原花青素的抗氧化能力相對次之。獼猴桃原花青素的抗氧化能力相關研究偏少，作為一種天然抗氧化劑，有待于對其進一步研究。

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