論文發表最好的網站生防木霉拮抗黃瓜枯萎研究

　　木霉(Trichoderma spp.)屬真菌界、雙核菌門、半知菌亞門、絲孢綱、叢梗孢目、叢梗孢科、真菌屬,是迄今為止研究和應用最多的一類生防菌[1]。木霉的生防機制復雜,主要包括競爭、重寄生、抗生、溶菌等[2]。研究木霉對病原菌的作用機制及防治效果,可以優選木霉菌株,從而提高生防效率。

　　摘要木霉是一種重要的生防菌,對黃瓜枯萎病菌有很強的拮抗作用,主要作用方式有:競爭、重寄生、抗生、溶菌作用。溫室盆栽試驗顯示,木霉可顯著防治黃瓜枯萎病菌。

　　關鍵詞木霉;黃瓜枯萎病菌;生防

　　1材料與方法

　　1.1試驗材料

　　以病株上分離的黃瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)為拮抗對象,土壤中分離的木霉菌株為拮抗菌。

　　1.2試驗方法

　　1.2.1競爭作用。采用對峙培養法[3],在直徑為9cm的PDA平板一側接種直徑為5mm的病原真菌菌絲塊,在平板另一側接種拮抗菌,28℃共培養,觀察兩菌的生長情況。

　　1.2.2重寄生作用。在PDA培養基中央放置1塊20mm×20 mm無菌蓋玻片,在左側距蓋玻片40mm處接種木霉,右側距蓋玻片20mm處接種黃瓜枯萎病菌,28℃恒溫培養。取下蓋玻片,于顯微鏡下觀察菌絲體的作用方式。

　　1.2.3抗生作用。在裝有100mL PDB的三角瓶中接入直徑5mm的木霉菌塊,28℃、150rpm培養6d,取濾液離心后過0.22μm細菌濾器。在90mL、45℃的PDA中加入10mL上述濾液,搖勻倒成平板,接種直徑為5mm的黃瓜枯萎病菌菌塊。28℃恒溫培養,觀察生長情況。

　　1.2.4溶菌作用。將培養4d的木霉發酵液8 000rpm離心10min。取15mL上清液倒入培養皿中,接入黃瓜枯萎病菌菌塊。淺層培養5d后觀察生長情況。以高溫滅菌的木霉上清液中培養的病菌菌塊為對照。

　　1.2.5盆栽試驗。將黃瓜種子經70%乙醇消毒1min,2% NaClO消毒5min,55℃溫水浸15~20min,25℃浸泡2~3h,無菌水沖洗3次,25~30℃下催芽1~2d。將黃瓜枯萎病菌接種到麩皮∶玉米粉為3∶1的培養基中,28℃恒溫箱中培養至長滿整個三角瓶。將催芽基本一致的黃瓜苗在木霉菌懸液(約1×108cfu/mL)中浸1h,取出于滅菌濾紙片上干燥1h后,播種于拌有黃瓜枯萎病菌制劑的土壤中。以無菌水浸種處理為對照。

　　2結果與分析

　　2.1競爭作用

　　平皿對峙試驗顯示,木霉生長迅速,可快速占據空間,有很強的生長競爭優勢,能有效抑制黃瓜枯萎病菌的生長。

　　2.2重寄生作用

　　顯微鏡下觀察到木霉菌絲體纏繞著黃瓜枯萎菌絲生長,并在病菌菌絲上產生大量分枝,產生寄生作用。

　　2.3抗生作用

　　在PDA培養基中加入10%的木霉發酵液后,黃瓜枯萎病菌菌絲生長不旺盛,與對照有顯著的差異。

　　2.4溶菌作用

　　在未滅菌的木霉上清液中培養的黃瓜枯萎菌塊,僅有細小菌絲的生長,數量較少;而在滅菌后的上清液中,黃瓜枯萎菌生長旺盛,形成大塊菌絲團。

　　2.5盆栽防效試驗

　　盆栽試驗結果表明,與對照相比,木霉浸種處理的黃瓜幼苗死亡率為25.0%,顯著低于對照的66.7%。

　　3結論與討論

　　作為安全而環境友好的生防因子,木霉在田間的施用可有效地防治作物病害,從而避免大量使用農藥導致病原菌抗藥性的產生、作物農藥含量超標及環境污染等問題[4-6]。因此,對木霉生防機制深入而全面的研究,將對綠色農業的可持續發展產生重要的推動作用。

　　4參考文獻

　　[1] 辛雅芬,商金杰,高克詳.拮抗木霉菌的生防機制研究進展[J].東北林業大學學報,2005,33(4):88-91.

　　[2] HARMAN G,HOWELL C R,VITERBO A,et al.Trichoderma species-opportunistic,avirulent plant symbionts[J].Nature,2004(2):43-56.

　　[3] 蒲金基,曾會才.綠色木霉LTR12-1對黃瓜枯萎病菌防治作用機制的初步研究[J].熱帶農業科學,2002,22(4):22-25.

　　[4] 呂天曉,徐鳳花,李世貴,等.生防木霉菌原生質體的制備及再生研究[J].生物技術通報,2009(4):130-134.

　　閱讀范文：林業期刊刊發高等林業教育與生態文明

　　建設生態文明是我國順應經濟社會發展的需要適時提出的發展戰略。這些年來，我國經濟增長迅速，但經濟發展很大程度上是以消耗資源和破壞生態為代價的，生態問題已經嚴重影響到經濟發展的質量和廣大人民群眾的生活和身體健康。