近年來隨著尿液分析儀的迅速普及,測量參數(shù)向著快速、簡便、準(zhǔn)確的方向發(fā)展,為臨床提供了更好的診斷依據(jù);顯微鏡檢查耗時(shí)費(fèi)力,在一些醫(yī)院尿液顯微鏡檢查有逐漸被尿液分析儀替代的趨勢。為此,筆者對(duì)400例門診患者的隨機(jī)尿樣,用尿液分析儀潛血反應(yīng)和尿液顯微鏡檢查紅細(xì)胞兩種方法進(jìn)行檢驗(yàn),并對(duì)兩種方法的符合程度進(jìn)行比較。
1原理與方法
1.1尿液分析儀使用的是干化學(xué)試紙法,是根據(jù)多聯(lián)試帶上各模塊與尿液成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學(xué)物質(zhì),如直接檢測紅細(xì)胞、白細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)涵物,間接推斷細(xì)胞的有無。尿液分析儀潛血反應(yīng)原理是:血紅蛋白(Hb)中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態(tài),后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯(lián)甲苯胺發(fā)生由黃色→草綠色→深藍(lán)色的顏色變化。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細(xì)胞等有形成分直觀真實(shí)地呈現(xiàn)在鏡下,是對(duì)底物的真實(shí)反映。
1.2方法[2]
1.2.1尿液分析儀檢測尿潛血于混勻的10 ml新鮮尿液中浸入尿試紙條1s后取出,上儀器進(jìn)行測定,自動(dòng)打印結(jié)果。結(jié)果報(bào)告分為:(-、+/-、+、++、+++、++++)。使用URiSCANTM尿液分析儀及其配套的尿分析試紙條。
1.2.2鏡檢取尿液10 ml于試管中,以1500r/min離心5min,棄去上清液,留沉淀0.2 ml。充分混勻后,取出約20μl于載玻片上,加蓋玻片(2.0 cm×2.0 cm),然后用較弱的光線以低倍鏡觀察全貌,以免漏掉量少而有意義的物體,再用高倍鏡辨認(rèn)細(xì)胞。結(jié)果報(bào)告為:х個(gè)/高倍視野(HP)。
2結(jié)果
400例門診患者的隨機(jī)尿樣用兩種方法同時(shí)檢查。
3討論
由于兩種檢驗(yàn)方法的原理不同,影響其因素也不同,因而兩種檢驗(yàn)方法的結(jié)果存在一定的差異。
3.1假陽性即尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性,鏡檢陰性,其常見原因有:①血紅蛋白(Hb)尿液分析儀潛血反應(yīng)既能與完整的RBC發(fā)生陽性反應(yīng),也可與RBC溶解釋放的Hb發(fā)生陽性反應(yīng),而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微,定性為陰性。疾病時(shí),尿中Hb有兩個(gè)來源:一是發(fā)生血管內(nèi)溶血,血漿Hb超過了結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力,游離Hb從尿中排出。另一個(gè)是尿路(尤其是上尿路)出血,RBC在高滲或(和)低滲時(shí)破壞Hb逸出。此時(shí),尿液分析儀潛血反應(yīng)陽性,但尿沉渣鏡檢不見RBC或僅見RBC碎片;②肌紅蛋白(Mb)分子中也含有血紅素基團(tuán),具有過氧化物酶活性。
Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中,正常人尿中含量甚微,不能檢出。當(dāng)心肌或骨骼肌發(fā)生嚴(yán)重?fù)p傷時(shí),血漿Mb增高,經(jīng)腎臟排泄,使尿液Mb含量增高,故潛血反應(yīng)呈陽性,鏡檢RBC為陰性;③某些患者尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)定酶,也可使試劑塊發(fā)生顏色改變,出現(xiàn)潛血反應(yīng)陽性,鏡檢為陰性;④某些氧化性污染物,例如次氯酸鹽會(huì)導(dǎo)致潛血反應(yīng)假陽性;⑤菌尿尿液是細(xì)菌良好的培養(yǎng)基,菌尿時(shí)有些細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生氧化性物質(zhì),使得試劑塊發(fā)生顏色變化,導(dǎo)致潛血反應(yīng)陽性,鏡檢RBC為陰性[3]。此外,微生物過氧化酶的侵入也可引起假陽性;⑥長時(shí)間存放及高溫實(shí)驗(yàn)證明,標(biāo)本不新鮮,存放時(shí)間長或高溫存放,使?jié)撗磻?yīng)的陽性率相對(duì)增高,而RBC鏡檢相應(yīng)減少,測試結(jié)果極有可能出現(xiàn)假陽性。因此,建議尿液標(biāo)本存放時(shí)間不得超過4 h[2];⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正確,均可造成測試結(jié)果假陽性;⑧尿液分析儀靈敏度過高[0.2 mg/dl出現(xiàn)(++)],“級(jí)差”范圍太大[0.8~50 mg/dl級(jí)為(+++)],常會(huì)遇到儀器測試為(++),而鏡檢測試紅細(xì)胞為陰性,臨床上又找不到任何導(dǎo)致血紅蛋白尿原因的情況。再是尿中的圓形草酸鈣結(jié)晶的大小及形態(tài)和紅細(xì)胞非常相似,可導(dǎo)至尿液分析儀對(duì)紅細(xì)胞的錯(cuò)誤判斷。
3.2假陰性即鏡檢陽性,尿液分析儀潛血反應(yīng)陰性,其常見原因有:①食物或藥物的影響:由于飲食或藥物使尿液呈堿性時(shí),RBC溶解破裂,形成褐色顆粒,潛血反應(yīng)呈陽性,而鏡檢呈陰性;②VitC尿液中大量存在時(shí),能競爭性奪取反應(yīng)產(chǎn)生的氧,引起假陰性反應(yīng);③高比重、高蛋白尿影響結(jié)果。
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