1實驗原理
氯霉素和氧氟沙星對土壤微生物中的細菌可能具有抑制作用,可以測定細菌對淀粉的分解速度快慢,來判斷抗生素是否對土壤細菌有殺滅或抑制作用。事前通過對比實驗確定氯霉素試劑和土壤浸出液都不能使碘液變藍。如果在土壤浸出液中加入淀粉溶液,在一定的溫度下,土壤微生物對淀粉會分解,用碘液檢驗顏色是否變藍來判斷分解的快慢。受藥物抑制和殺滅的土壤細菌對淀粉的分解速度會受到影響,從而推斷出抗生素對土壤微生物的影響。
2實驗內容
2.1器材裝置
1%的淀粉糊、碘液、土壤浸出液、氯霉素試劑(每支0.1g)、氧氟沙星膠囊(每粒0.1g)、100mL錐形瓶、滴管、試管、溫度計、棉花。
2.2材料準備
①配置1%的淀粉糊:取2g淀粉加入200mL的熱水中,用酒精燈加熱煮沸,冷卻;②配置碘液:取2g碘化鉀和1g碘,溶于10g蒸餾水中,待溶解后,加入300mL的蒸餾水;③配置土壤浸出液:取100g肥沃的菜園土,放入1000mL燒杯中,加1000mL蒸餾水,用玻棒充分攪拌,用4層的紗布濾去浮渣和草屑,如有泥沙用4層的紗布再過濾一次。
3實驗步驟
實驗步驟是:①取100mL的錐形瓶10只,用水洗凈后放在烘箱中2h,殺死錐形瓶上殘留的微生物;②給錐形瓶編號,分別是A1、A2,A3、A4、A5;B1、B2、B3、B4、B5;③用量筒準確量取土壤浸出液50mL,分別倒入10只錐形瓶中;④用量筒準確量取15mL的淀粉溶液,分別加入到10只盛土壤溶液的錐形瓶中;⑤在A1到A5號錐形瓶中依次加入4、3、2、1、0支氯霉素試劑(每支0.1g),在B1到B5號錐形瓶中依次加入4顆、3顆、2顆、1顆、0顆氧氟沙星膠囊的粉末(每顆0.1g)。用棉花塞住瓶口;⑥把兩組裝置同時放在溫暖,但陽光不直射的地方。測定實驗時的氣溫;⑦每天固定時間用滴管取2mL溶液,滴加碘液,檢查微生物對淀粉的分解情況,并及時記錄看到的現象(表1)。
4實驗現象
本實驗不同于在人體內的環境,細菌對淀粉等有機物的分解受pH和溫度的影響較大,在通常溫度下,常常需要一周才能看到明顯的現象。實驗的結果是:剛開始時滴加碘液后,全部變成藍色,而未加入抗生素的A5、B5號錐形瓶中的淀粉在一周后,滴加碘液由原來的藍色逐漸變成紫色、淺棕色,最后變成淡黃色。其余錐形瓶中的溶液在滴加碘液后仍為藍色或淡藍色。另外,加入0.4g和0.1g氯霉素試劑和氧氟沙星膠囊粉末的錐形瓶中的淀粉分解的時間相差不大,藍色的消失不明顯,其中氧氟沙星的顏色變化早于氯霉素,說明其對土壤微生物的抑制作用比氯霉素弱。
5實驗分析
實驗結果表明,抗生素對土壤細菌有一定的抑制作用,但并不是全部抑制。從作用效果上看,與劑量大小并不是成正比,隨著抗生素劑量的加大,對細菌的抑制作用效果并不十分明顯。實驗啟示說明:適量的抗菌素能夠達到抑制細菌等微生物的效果,濫用抗生素和過量使用抗生素,帶來的將是副作用。
作者:鄭國建 單位:江蘇省如皋市港城實驗學校初中部