近年來,隨著畜牧業的快速發展,畜禽養殖規模的不斷擴大,動物疾病也隨之增加,呈現出更加復雜化的特點。細菌性疾病作為危害畜牧業發展的一類重要疾病,目前呈現出了多種發病狀態。本文是一篇畜牧養殖論文范文,主要論述了應用藥敏紙片法指導獸醫臨床用藥體會。
摘 要:藥敏試驗是指對敏感性不能預測的分離菌株進行試驗,在體外測試病原微生物對抗菌藥物的敏感程度,以指導獸醫臨床合理選擇治療藥物的微生物學試驗。藥敏試驗是獸醫臨床工作中的一項基本技能,而藥敏紙片法是藥敏試驗中最普遍的方法。該文主要通過實例介紹了藥敏紙片法在獸醫臨床上的應用及其指導意義,供同行參考。
關鍵詞:藥敏試驗,藥敏紙片法,耐藥性,接種培養
大多養殖戶由于飼養管理技術不高、動物疫病的預防意識不強,再加上缺乏動物臨床診療知識,對臨床發生的動物疾病很難進行準確診斷和針對性的治療,一旦發病,不能對其發病原因進行有效分析,導致盲目濫用抗生素,不但沒有控制病情,還造成了病情的延誤,而且產生了大量的耐藥菌株,不少耐藥菌株對多種抗生素產生耐藥性。筆者在臨床診療中遇到過很多次應用抗生素治療細菌性疾病無效的情況。為了提高抗生素對細菌性疾病的治療效果,合理使用抗生素,獸醫工作者常用到藥敏試驗來指導我們臨床用藥,而藥敏紙片法是藥敏試驗中最普遍的方法,筆者常在臨床中應用該方法收到了較為滿意的效果。
1 實驗方法
1.1 藥敏紙片的制備 藥敏紙片法中使用的藥敏紙片市場上很容易購買到,但也可自制,具體方法如下:取定性濾紙,用打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片,根據實際需要制成相應數量。以制成100片為例,將100片圓片放入清潔干燥的小瓶或小平皿中,包扎,經15磅高壓滅菌15~20min后,置37℃溫箱中使其完全干燥。將供試驗的抗菌藥物按其有效濃度稀釋成1mL,加入上述含有100片紙片的小瓶內,不時翻動,使濾紙片與藥液充分混合,浸泡30min即可,置于37℃溫箱過夜或陰涼處干燥備用。在溫箱中的時間不宜過長,以免藥物失效。干燥完成后密封,放置冰箱中保存,切勿受潮,一般能保存4~6個月。
1.2 接種培養 取發病動物的病料或組織(如心、血、脾、肝臟、淋巴結等)無菌接種到培養基中,在37℃溫箱中培養24h,挑選典型菌落備用。在超凈工作臺中或酒精燈旁,用接種環挑取適量細菌培養物,以劃線方式接種到固體培養基表面,或用無菌生理鹽水稀釋菌落,用蘸有菌懸液的無菌棉簽均勻涂布到固體培養基表面,蓋上平板,室溫放置數分鐘。然后用無菌鑷子將紙片粘貼于固體培養基表面,一定要注意紙片與培養基表面要完全接觸,各紙片中心間距應大于24mm,并記錄每種藥敏紙片的位置。貼完后放置15min,再置于37℃溫箱中培養12~18h后觀察結果。必要時,可做2組平行試驗,以致實驗結果更準確。
1.3 結果判定 用抑菌圈的直徑(φ)表示,抑菌圈的直徑越大,抑菌效果越好。即抑菌圈直徑(φ)≥20mm者為高度敏感;抑菌圈直徑16≤(φ)<20mm者為中度敏感;抑菌圈直徑10≤(φ)<16mm者為低度敏感;抑菌圈直徑(φ)<10mm者為耐藥。
2 臨床實例
貴池區梅龍街道某一養雞場飼養肉雞1 100余只,2013年4月12日開始發病,發病當日為36日齡,4月13日上午10:00許,筆者到現場時,約有15%發病,已經死亡8只,病雞表現為采食量下降,體溫升高,精神沉郁,羽毛松亂,離群呆立,縮頸閉眼,頭常縮于翅下,不愿走動,排淡黃色或黃白色稀便,泄殖腔下方羽毛潮濕,污穢粘連,有的呼吸困難,張口伸頸,咳嗽、打嗆。解剖癥狀明顯的兩只雞,發現實質器官充血、淤血;氣囊發炎,氣囊壁渾濁,有黃白色纖維素性滲出物;肝腫脹,有灰白色壞死灶;肺充血淤血;脾、腎臟腫大;心包積液,心外膜有散在出血點;腸炎腹水等癥狀,筆者根據臨床癥狀和病理變化懷疑是大腸桿菌感染(后經實驗室培養和生化實驗證實)。隨后將解剖的兩只雞取其心肝組織,于當日上午11:00在貴池區動物疫病預防與控制中心實驗室做了藥敏試驗(藥敏紙片法),4月15日上午08:00,藥敏試驗結果顯示該菌株對氟苯尼考和硫酸新霉素敏感,筆者隨即告知養殖戶把治療藥物更換為氟苯尼考和硫酸新霉素。治療效果明顯,4月13日10:00到15日08:00共死亡23只雞,15日當天死亡9只雞,15日之后共死亡7只雞。
3 總結與體會
隨著新型致病菌的不斷出現,每種致病菌對不同的抗菌藥物的敏感性不同,同種細菌的不同菌株對同一抗菌藥物的敏感性也有差異,也就是說再好的抗菌藥物和再好的獸醫人員,都不能保證所用的抗菌藥物是特效藥物,因此藥敏試驗在獸醫工作中有著日益重要的實際意義。藥敏試驗中的藥敏紙片法因其操作簡單、成本較低的特點,被大多數獸醫工作者所青睞。該方法優點如下:一是能夠經濟、有效地測定細菌對抗菌藥物的敏感程度,指導獸醫臨床合理用藥,使獸醫工作者能夠及時準確的用藥,避免了抗生素的濫用,既節約了藥物的使用,又縮短了動物病程,給養殖戶挽回了許多不必要的損失;二是可以及時選擇敏感藥物治療動物疾病,規范了抗菌藥物的使用,延長了新藥的使用壽命,還可以為新研制藥物性能評估提供有價值的信息;三是可以及時掌握各種菌種和菌株的耐藥性,對流行病學調查建立監控,同時采取相應的措施預防和控制細菌性疾病的流行,為動物疫病預防與控制機構提供防治依據,有效控制區域性的細菌性疫病的發生。因此,獸醫工作人員要重視藥敏紙片法在獸醫臨床上的應用。
畜牧養殖論文發表期刊推薦《青島農業大學學報(自然科學版)》(季刊)創刊于1960年,是經國家新聞出版總署批準出版的國內外公開發行的綜合性學術期刊,由山東省教育廳主管、青島農業大學主辦、《島農業大學學報》編輯部編輯出版、發行。作為學術研究和科技信息主要交流平臺,學報本著立足學校,面向全國的辦刊定位,突出“四個注重”,即注重學術性、注重應用性、注重為學校教學科研服務、注重為區域經濟與社會發展服務,發揚優勢、突出特色。其辦刊宗旨是:“傳承文明,創新理論,增進學術交流,推動科學技術盡快轉化為生產力,服務社會”。
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