一、方法與結果

1、植物形態

多年生草本，高30~80cm。開花植株鱗莖直徑大多在1cm以上。葉對生，有的中部兼3~4枚輪生或散生，條形至條狀披針形，長5~10cm，寬3~7?~12?mm，先端有的稍彎曲?；▎味?，每花有3枚葉狀苞片，苞片先端有時梢彎曲，但不卷曲；花被片6，長3~4cm，綠黃色，在開花后期顏色會略有加深，無方格斑，通常僅在花被片先端近兩側邊緣有紫色斑帶；外輪3片狹倒卵狀矩圓形，寬9~12mm，先端渾圓；內輪3片近匙形，上部寬12~17mm，基部寬3~5mm，先端驟凸而鈍，蜜腺窩幾不凸出或稍凸出；花藥近基著，花絲通常具小乳突；花柱分裂部分長3~4mm。蒴果長1.8~2.5cm，棱上的狹翅寬0.5~2mm?；ㄆ?~6月，果期6~7月。

1、性狀鑒定照

2010年版中國藥典川貝母項下性狀及附錄Ⅱ項下藥材、飲片取樣法和檢定通則進行。

2、顯微鑒定照

2010年版中國藥典川貝母項下鑒別及附錄Ⅱ項下顯微鑒別法進行。不同品種來源的川貝母顯微特征存在差異：暗紫貝母?松貝、青貝?垂周壁可見細小點狀角質栓，可見螺紋或環紋導管；各種規格太白貝母均無角質栓，并偶見網紋導管。

3、浸出物測定

按照2010年版中國藥典一部附錄XA項下水溶性浸出物測定法的熱浸法和醇溶性浸出物測定法的熱浸法進行測定。

4、總皂苷含量測定各取樣品粉末約5.0g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇150mL回流提取8h，回收濃縮至30mL，冷卻，加入乙醚100mL混勻，密塞，靜置過夜，傾出上清液，沉淀用乙醚20mL洗滌后用60mL甲醇加熱溶解，用干燥濾器濾過，濾液再加入乙醚100mL，密塞，靜置過夜，傾出上清液，用干燥濾器濾于燒杯中，揮干大部分溶劑，然后轉移至稱量瓶中，于50oС下在干燥箱中干燥至恒重，稱重，得樣品中皂苷的含量。

5、總生物堿含量測定

（1）對照品溶液的制備：取西貝母堿對照品適量，精密稱定，加三氯甲烷制成每1mL含0.80mg的溶液，即得。

（2）供試品溶液的制備：取樣品粉末?過三號篩?約2.0g，精密稱定，置100mL圓底燒瓶中，加濃氨試液3mL，浸潤1h，加三氯甲烷-甲醇?4:1?混合溶液40mL，置65~70oС水浴加熱回流4h，放冷，濾過，濾液置50mL量瓶中，用適量三氯甲烷-甲醇?4:1?混合溶液洗滌藥渣2~3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇混合溶液至刻度，搖勻，得供試品三氯甲烷-甲醇溶液。精密量取25.0mL，置100mL錐形瓶中，水浴上揮干溶劑，加入氯仿20.0mL溶解，加水15.0mL，密塞，劇烈振搖3min后，轉移至分液漏斗中，放置10min。分取下層三氯甲烷液，過濾，即得。

（3）測定法：精密吸取三氯甲烷液10mL，置25mL量瓶中，精密加水5mL、再精密加0.04%溴鉀酚綠緩沖液2mL，密塞，超聲3min，劇烈振搖后，轉移至分液漏斗中，放置30min。分取三氯甲烷層，過濾，精密吸取三氯甲烷液5.0mL，置已加入0.001mol/L氫氧化鉀無水乙醇溶液1.0mL的10mL量瓶中，搖勻，以搖勻的三氯甲烷?5.0mL?+0.001mol/L氫氧化鉀無水乙醇溶液?1.0mL?為空白，照紫外可見分光光度法，在618nm的波長處測定吸光度。計算未水解樣品中生物堿含量，按下面公式計算藥材中生物堿的含量：生物堿含量=未水解測得的生物堿量/樣品重量。

（4）標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL，置25mL量瓶中，分別補加三氯甲烷至10mL，按“2.6.3”項下方法測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程為Y=1.6802X+0.0002，r=0.9991。

（5）生物堿苷的含量測定：另精密量取供試品三氯甲烷-甲醇溶液25.0mL，置100mL錐形瓶中，揮干溶劑，加入0.5mol/L的硫酸溶液10.0mL溶解，于沸水上水浴水解10h，冷卻后加入2.0mol/L的氫氧化鈉溶液4.5mL，濃氨水1mL調節pH值至堿性，用三氯甲烷萃取3次，每次8.0mL，合并三氯甲烷層至25.0mL量瓶中并用三氯甲烷定容至刻度，用20mL蒸餾水洗滌三氯甲烷層，轉移至分液漏斗中，放置30min。分取下層三氯甲烷液，過濾，精密吸取三氯甲烷液5~10mL，置25mL容量瓶中，分別補加三氯甲烷至10.0mL，精密加水5mL、再精密加0.04%溴鉀酚綠緩沖液2mL，密塞，超聲3min，劇烈振搖后，轉移至分液漏斗中，放置30min。分取三氯甲烷層，過濾，精密吸取三氯甲烷液5.0mL，置已加入0.001mol/L氫氧化鉀無水乙醇溶液1.0mL的10mL量瓶中，搖勻，以搖勻的三氯甲烷?5.0mL?+0.001mol/L氫氧化鉀無水乙醇溶液?1.0mL?為空白，照紫外可見分光光度法，在618nm的波長處測定吸光度。計算水解后樣品中生物堿含量，計算藥材中生物堿苷的含量：生物堿苷含量=1.379×［?水解后測得的生物堿量未水解測得的生物堿量?/樣品重量］。

二、結論

太白貝母栽培品與野生品相比，前者開花期植株生長高度較整齊，后者開花期植株高矮差距大；野生鱗莖較光潔，栽培品體表欠光滑，基部隘縮。顯微特征上各種商品規格太白貝母均無角質栓，與李萍等研究結果一致，均符合2010年版中國藥典一部川貝母鑒別項下的規定。太白貝母水溶性浸出物總體略高于暗紫貝母，部分商品規格太白貝母水溶性浸出物含量顯著高于暗紫貝母。水溶性浸出物結果表明，暗紫貝母的含量與其大小成反比，即松貝明顯高于青貝；而太白貝母的含量與其大小成正比，即花生大貝、大尖等較大者明顯高于松尖、小尖等。鑒于川貝母水溶性浸出物含量明顯高于醇溶性浸出物含量，且水溶性浸出物為其重要的活性部位之一，因此有必要增加川貝母藥材的常規理化試驗項目，加強藥材綜合質量控制，建議2015年版中國藥典增加川貝母水溶性浸出物的含量限度。通過本試驗結果，其限度建議為川貝母的水溶性浸出物?熱浸法?不得少于9.0%。

三、討論

目前研究表明，川貝母皂苷具有顯著的鎮咳、祛痰等生物活性，為其主要的有效部位之一?？傇碥盏暮繜o顯著性差異，含量范圍較為穩定，可作為川貝母質量控制的方法之一。因此皂苷類是否更能代表川貝母的藥效特色，進而在選擇川貝母“指標成分”時加以足夠的重視，都是值得思考的。但與趙德永等研究結果不一致，可能為品種、產地、環境因素、采收期、生長年限等原因所致，故需結合更多樣本對川貝母總皂苷含量的評價進行深入研究。傳統認為，生物堿是川貝母的主要有效成分之一，是貝母類藥材及成藥的常用檢測指標，松貝是川貝母中品質最佳的品種，其生物堿含量按理應較高。而本試驗的測定結果卻表明，太白貝母栽培品各規格均顯著高于松貝，該測定結果與以往文獻研究結果相吻合，表明太白貝母所具有的含較高總生物堿的特性是其特有的生物學特性。生物堿含量隨藥材的大小增加而增加，但生物堿苷、總生物堿含量隨藥材的大小增加反而有下降的趨勢，可能與太白貝母的生長年限有關，因太白貝母鱗莖的產量則是隨著生長年限的增加而增加、生物堿含量隨生長年限先升高而降低。這一結果意味著，能代表川貝母商品規格的藥效特色不僅有生物堿類成分，而且可能是其他類型成分的綜合作用，需結合藥理、藥效和臨床應用來對其進行進一步的研究。太白貝母所表現出的浸出物含量、總皂苷含量、生物堿含量與暗紫貝母明顯相似并高于暗紫貝母，為太白貝母可完全代替川貝母提供了可靠的物質基礎。川貝母藥材傳統以松貝為優，多以野生藥材入藥，但從本實驗的研究數據來看，在太白貝母列入川貝母后，傳統的川貝母“以松貝為優”的評價有待一步探討。

作者：沈力 周濃 付紹智 易東陽 賈晗 陳洪源 吳應梅 單位：重慶三峽醫藥高等?？茖W校 重慶三峽學院生命科學與工程學院